• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        基本方案 滴液法+负染法

        相关实验:细菌透射电镜样品制备实验

        最新修订时间:

        原理

        由于生物样品主要由碳、氢、氧、氮等元素组成,散射电子的能力很低,在电镜下反差小。所以在进行电镜的生物样品制备时通常还须采用重金属盐染色或金属喷镀等方法来增加样品的反差,提高观察效果。负染色法就是用电子密度高,本身不显示结构且与样品几乎不反应的物质(如磷钨酸钠或磷钨酸钾)来对样品进行「染色」, 由于这些重金属盐不被样品成分所吸附而是沉积到样品四周,如果样品具有表面结构,这种物质还能穿透进表面上凹陷的部分,因面在样品四周有染液沉积的地方,散射电于的能力强,表现为暗区,而在有样品的地方散射电子的能力弱,表现为亮区。这样便能把样品的外形与表面结构清楚地衬托出来。负染色法由于操作简单,目前在进行透射电镜生物样品制片时比较常用。

        材料与仪器

        步骤

        1. 将适量无菌水加入生长良好的细菌斜面内,用吸管轻轻拨动菌体制成菌悬液参用无菌滤纸过滤,并调整滤液中的细胞浓度为 108~109 个/毫升。


        2. 取等量的上述菌悬液与等量的 2% 的磷钨酸钠水溶液混合,制成混合菌悬液。


        3. 用无菌毛细吸管吸取混合菌悬液滴在铜网膜上。


        4. 经 3~5 min 后,用滤纸吸去余水,待样品干燥后,置低倍光学显微镜下检查,挑选膜完整、菌体分布均匀的铜网。


        有时为了保持菌体的原有形状,常用戊二醛、甲醛、锇酸蒸气等试剂小心固定后再进行染色。(见「辅助方案 固定」)


        来源:丁香实验

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序