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        用盐酸胍进行干燥膜的变性/复性循环

        相关实验:编码 DNA 结合蛋白的 cDNA 克隆的检测、纯化和鉴定

        最新修订时间:

        原理


        材料与仪器

        试剂、试剂盒

        步骤

        1) 按基本方案步骤1〜15进行。


        2) 将平皿在4℃冷却10 min。用针扎孔标记各膜的位置。小心地揭起膜,室温下在空气中瞭干15 min。


        3) 将膜浸于HEPES结合缓冲液/6 mol/L盐酸狐中,4℃轻轻摇动温育10 min。在新 鲜的HEPES结合缓冲液/6 mol/L盐酸胍中重复1次。


        4) 将膜浸于HEPES结合缓冲液/3 mol/L盐酸胍(每10张膜50 mL)中,4℃ 5 min。 重复4次。每次用HEPES缓冲液及浓度较前次减半的盐酸胍进行漂洗。


        5) 将膜浸于HEPES缓冲液(50 mL/10张膜)中,4℃ 5 min。用新鲜缓冲液重复洗1次。


        6) 在BLOTTO中温育封闭。


        7) 进行滤膜筛选。

        来源:丁香实验

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