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        啮齿动物体内的病毒投递

        相关实验:α-病毒:作为基因 转移载体的西门里克森林病毒和辛德毕斯病毒

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        啮齿动物体内的病毒投递

        材料

        试剂

        动物:大鼠或小鼠

        B H K - 2 1 细胞

        克他命

        病毒储存液

        根 据 方 案 1 制备可表达目的基因的重组 a 病 毒 ,使用前需要用〇 • 22 um 滤器过滤灭菌。

        X ylazine

        仪器

        滤器•(无菌, 0.22um,微孔)

        H am ilton 注 射 器(10/m1)

        注 射 器(不锈钢)

        微型输液泵

        聚乙烯管

        定向设备

        方法

        在全身麻醉并伴有体温调节控制及氧气补充的情况下进行微注射。

        1 . 用方案 3 确定病毒储存液在 B H K - 2 1 细胞中的大概滴度。

        2 . 稀释病毒,使之适用于实验条件。

        对纹状体、扁桃体或脑皮层,使用 IO5个病毒颗粒;对脑室,使用 IO7 个病毒颗粒。

        3 . 通过每千克体重腹膜内注射 2 0 0 m g 克他命和 IOmg x y la zin e 来麻醉实验动物。

        4 . 根据动物调整定向设备。

        5.用不锈钢注射器吸取病毒,通过聚乙烯管连接微型输液栗和 IOul H am ilton syrin g e。

        6 . 以 0. 5ul/m i n 的速度融合病毒溶液。

        7.将针在原位多放置 2m i n 。

        8.将针缓慢的拿开。

        9•缝合伤口,手术后 3〜4 h 内使动物处于温暖的环境下。

        10•简单的健康检测(如体重、体温和食量等)和行为反应。

        11.在注射后的不同时间点,收集组织和鉴定转基因的表达

        来源:丁香实验

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