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        InstaStain Blue 凝胶纸染色实验

        相关实验:单向聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        1.电泳结束后,在一塑料容器中倒入足够浸没凝胶的水,例如,一块典型的 mini 胶(8 cmXl0 cm 或 8 cmX8 cm) 需要 IOOml 水。将凝胶放入容器中,轻摇 5 min。

        2.用水重复洗两次以上(洗涤的总时间是 l5 min)。

        3.弃去水,加入足够浸没凝胶量的试剂 A,室温下摇动凝胶 1 〇 111^。

        4.从试剂 A 中取出凝胶,放置到一块玻璃板上。注意保持凝胶湿。

        5.将 InstaStamBlueGelStainPaper 放到凝胶上,注意蓝色面朝下。用玻璃棒碾平赶出气泡。

        6.用试剂 A 湿润三张滤纸,将湿润的滤纸放置到 instastainBlue 凝胶染色纸上面。用玻璃棒碾平赶出气泡。I^

        7.把第二块玻璃板放到滤纸上。

        8.将凝胶/纸/玻璃板夹层放进微波炉,用「高」档加热至温热(约 8s)。勿让凝胶过热,胥则会粘住 InstaStainBlue 凝胶染色纸。

        9.移去上层玻璃板、滤纸和 InstaStainBlue 凝胶染色纸,将凝胶放进装有足够浸没凝胶的试剂 A 的容器中。

        实验提示:如果凝胶粘住了凝胶染色纸,将它们一起放入试剂 A 中,不断摇动直至纸能从胶上剥离下来,然后把凝胶转入新鲜的试剂 A 中。

        10.室温摇动凝胶 Ih。

        11.弃去试剂 A,室温下用水清洗凝胶至少 Ih 直到背景变得理想。这样,含有 20ng 蛋白量的条带就能显现。

        这块凝胶能在水中保存过夜,而且灵敏度不会降低,条带的颜色也不会变浅。

        来源:丁香实验

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