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        植物凝集素亲和层析

        相关实验:蛋白质糖基化的检测实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        1. 在含有 Ca2+、Mg2+ 的 TBS 中平衡植物凝集素亲和介质,用至少 20 个柱体积清洗。

        2. 在 5 ml —次性塑料吸管或注射器中制备 1 ml 植物凝集素柱。

        3. 以缓慢流速(小于 0.25 ml/min)将蛋白样本上柱,回收所有过柱子的流过液。

        4. 用 TBS 开始洗柱子,对于 1 ml 柱床体积的柱子,以 1 ml 1份收集流出液, 共收集 10 个 1 ml 流分。

        5. 用溶解在 TBS 中的半抗原开始洗脱,对 10 个柱体积来讲,收集 1 个柱体积 1 份的流出液。

        6. 如果必要,在 SDS-PAGE 电泳和检测前,用 TCA/DOC 沉淀来浓缩蛋白。

        来源:丁香实验

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