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        分离RNA

        相关实验:RNA 分离与分析实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        实验材料
        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        1. 收获标记细胞。

        2. 小心处置上清液,用含 0.3% SDS 的 10 mmol/L 乙酸缓冲液悬浮细胞沉淀,每 1 ml 压积细胞用 10 ml 缓冲液。

        3. 于室温用漩涡器振荡裂解细胞。

        4. 加等体积的水饱和酚,充分混匀,于 60℃ 加热 5 分钟。

        5. 再次用旋涡器振荡混匀,冰浴 15 分钟。

        6. 于 4℃ 以 5000 g 离心 10 分钟,此时溶液很清楚地分成 4 相:底部一小块不溶的沉淀,往上是酚相,再上是连接处的白色 SDS 相及上层含 RNA 的水相。

        7. 吸出上层水相至新离心管,加 2.5 倍体积含 2% 乙酸钠的乙醇沉淀 RNA,将离心管于 -20℃ 或 -70℃ 放置几小时以充分沉淀 RNA。

        8. 离心回收 RNA,抽干,将沉淀溶于少量 TE 缓冲液。

          

        来源:丁香实验

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