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        标记单层培养细胞

        相关实验：用[32P]磷酸标记细胞实验

        最新修订时间：

        材料与仪器

        实验材料
        HeLa 细胞
        试剂、试剂盒
        FCS磷酸盐
        仪器、耗材
        无磷酸培养基

        步骤

        1. 在含 10% FCS 的培养基中单层培养 HeLa 细胞至铺满 50% 左右。

        2. 倒掉完全培养基，加入新鲜的无磷酸培养基，培养 3~4 小时以耗尽胞内的磷酸储备。

        3. 换新鲜的无磷酸培养基，并加 32P 磷酸盐至 20 μCi/ml，继续培养 16 小时。

        4. 估算同位素的摄取量：

        (1) 加入同位素，混匀后立即吸出 5 μl 培养基于一小离心管，冰浴。

        (2) 培养结束后再取 5 μl 培养基。

        (3) 通过测定温育前后培养基活性差来估算放射活性。

        5. 提取并分析 RNA。

        来源：丁香实验

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