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        偶联了抗PECAM抗体的磁珠筛选细胞

        相关实验:人毛细血管内皮细胞的分离

        最新修订时间:

        材料与仪器

        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        1. 向“分离样品的制备”步骤10的细胞样品中加入 30 μl 偶联了抗 PECAM 抗体的磁珠。

        2. 细胞和磁珠混合物冰上保温 15 分钟。

        3. 磁体置于管侧 5 分钟,吸引筛选样品向磁体移动。小心吸弃上清,移开磁体。

        4. 向磁珠中加 2 ml PBS/FCS,轻轻混匀,确保没有大的团块。用磁体重复筛选。

        5. 重复步骤3和4三次。

        6. 磁粒悬于 1 ml 接种培养基中。

        7. 重悬细胞接种明胶包被的 T25 板,每 10 g 脂肪组织分离的细胞接种一块 T25 板。37℃ 振动培养。

        8. 细胞长至足够密度时传代,在最初的两次传代中要应用筛选程序,确保内皮细胞纯度。

        来源:丁香实验

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