• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        活力染色

        相关实验:活力染色

        最新修订时间:

        原理

        各种细胞操作,包括传代、冻存和原代组织的分离,均能导致细胞死亡。为了确定群体细胞中的存活细胞数,可采用台盼蓝染料排斥实验(Phillips 1973)。正常的健康细胞能排斥染料,但细胞膜完整性丧失后台盼蓝可弥散入细胞内。染料排斥实验是一种粗糙的估计细胞活力的方法,无法区别 10%~20% 的活力差异。除此之外,排斥染料的细胞有可能不贴壁或不能较长时问生存或繁殖。

        材料与仪器

        步骤

        1) 胰蛋白酶处理细胞(见上文“胰蛋白酶处理分离细胞”),无菌状态下取 0.5 ml 细胞用 PBS 稀释至每毫升 2X10 5 ~4X105 

        2) 向另一管中无菌加人 0.5 ml 上述细胞稀释液,并加人 0.5 ml 台盼蓝溶液 (0.4%)

        3) 细胞在染料中停留时间为不短于 3 分钟、不超过 10 分钟, 用毛细吸管取含染料的细胞悬液,靠毛吸作用使其进入计数器内。

        4) 至少计数总数 500 个细胞,蓝色细胞单独计数。记录不排斥染料的蓝色细胞的出现频度。

        5) 根据不排斥染料的细胞数计数细胞的活力百分比。

        例如:单层细胞胰蛋白酶处理后重悬于 5 ml 培养液中, 取 0.5 ml 细胞与 4.5 ml PBS 混匀,吸取 0.5 ml 悬浮于 PBS 中的细胞加于另一小管中,再加人 0.5 ml 台盼蓝溶液混匀。上述悬液加于计数器上,共计数 540 个细胞,62 个细胞不排斥染料呈蓝色,活性百分比为 88.5%。

        活力染色

        来源:丁香实验

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序