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        方案22.2 染料摄取法测定细胞生存力实验

        相关实验:染料摄取法测定细胞生存力实验

        最新修订时间:

        原理

        细胞悬液用碘化丙啶和二乙酰荧光素的混合液染色,用荧光显微镜或流式细胞仪检测。

        材料与仪器

        步骤

        材料

        无菌

        单细胞悬液
        双醋酸荧光素,10ug/ml,溶于 HBSS
        碘化丙啶,500ug/ml

        非灭菌

        荧光显微镜
        滤光片
        荧光素:激发 450/590 nm ,发射 LP 515 nm
        碘化丙啶:激发 488nm ,发射 615 nm

        操作步骤

        1. 细胞悬液的制备与染料排斥法相同(见方案 22.1),但是生长液中不含酚红。
        2. 以 1 : 10 的比例加入荧光素染料混合液,二乙酰荧光素的终浓度为 l ug/ml,碘化丙啶的终浓度为 50ug/ml。 :
        3. 将细胞置于 37°C , 温育 10 min。
        4. 将一滴细胞滴在载玻片上,盖上盖玻片,用荧光显微镜观察。

        来源:丁香实验

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