练习9：以干粉配制培养基储液并过滤灭菌

目的

制备复杂溶液及热不稳定试荆和培养钱的灭曲

训练目标

过滤的技术和容址的正确选择。比较正压和负珠过滤，监督：指导培养幕的制备。在过滤的初始阶段连续监督，在过滤过程中间歇监份，在抽样质量控制时连续监督。

时间：2h。

背景信息

以干粉配制培养地储液（见方案11.9)．过滤灭菌（见11.5.2节．方案11.12);可供选择的步骤（见方案11.11, 11,13, 11.14）。

示范材料和操作：一次性滤器和反复装配使用滤器的容最，最好有实物，如果没有，照片也可以．强调滤器尺寸（表面积）的概念。正压／负乐滤器的原理和优缺点（见11.5.2节）。示范滤器的操作，过滤、收集、抽样质控。

练习

概要

在超纯水中溶解粉末，过滤灭菌，分装到试剂瓶，抽样进行无菌测试。

标准方案

1）以粉未配制培养篆（见方案11.9）。
2）用真空过滤器过滤灭菌450 ml 培养基（见方案11.12）。

3）用正压过滤器过滤灭菌550 ml 培养基（见方案11.13）。

补充方案：特殊培养基的配制（见方案11.10)；高压灭菌培养基（见11.5.1节）；可反复使川的灭菌滤器（见11.3.6竹）；使用注射式滤器的过滤灭菌（见方案11.11).

用大型直线式过滤器过雄灭菌（见方案11.14)；血清（见11.5.3节；方案n.15）。

实验变化

将溶解的培养基分成两份．用正压过滤器过滤灭菌550ml培养基（见方案11.13),用负压过滤器过滤灭菌45oml培养基（见方案11.12）。

背景：C（入和碳酸氧盐（见9.2.2节）；缓冲液（见9.2.3竹）；标准灭菌方案（见11.5竹）。

数据

l）注意过滤之前和之后瞬时的pH.


2）在37t孵育普通的容器或试剂瓶1周，检在污染物。

分析

1）解释真空过滤器和正压过建器过滤的培养基pH的不同。

2）储存一段时间后pH是否会恢复？

3）何时要有选择的使用培养幕？

4）你会选择什么样的滤器

      a）过滤 5ml 结晶的溶液？

      b）过滤 10L 培养基？

       c）过滤 1L 血清？