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        2.2 无菌技术I:吸取与移液

        最新修订时间:

        原理

        目的

        快速准确地将液体从一个容器转移到另一个容器。

        训练目标

        熟练掌握吸管的使用,掌握必要的速度、准确性和精度。

        监督:开始时连续监督,然后让实习生重复练习并记录准确度。

        时间:30 min~ l h。

        背景信息

        已灭菌液体的操作(见 5.2.7 节);试剂瓶和培养瓶的操作(见 6.3.4 节);移液(见 6.3.5 节)。

        示范材料或操作:教师需示范操作吸管,将吸管插人移液器,转移液体,并对速度和准确性间的平衡给出指导建议。教师也需要示范用真空泵抽出液体(如果实验室采用)并解释其机制和安全性规定。

        标准方案

        在垂直式层流洁净台中的无菌技术(见方案6.”或在敞开的工作台上进行操作(见方案6.2)。在着手整个方案前,让实习生练习简单的操作,如将水从试剂瓶中移到废液烧杯中。这可以使得练习者在进行无菌操作前便能熟悉操作。

        材料与仪器

        步骤

        实验变化

        l)这个练习的目的在于提高双手的灵巧性及无菌环境下对吸管和试剂瓶的操作。下面的附加步骤用于提高趣味性和检查实习生的完成情况。

        2)先称量一’一下培养瓶并作为接受容器。

        a)向5个培养瓶中各加入sm!液体。
        b)使用sml吸管。

        3)使用25ml吸管。

        4)记录完成移液的时间。

        5)再一次称量培养瓶。

        6)孵育培养瓶看有没有污染。

        数据

        l)计算每个培养瓶中液体的平均重量。

        2)记录其范围并且

        a)计算分装液体体积所占的百分比,或

        b)计算平均值或标准差:

        i)将数值填入Excel表格。

        ii)将光标移动到数据列下面的一格。

        iii)按下标准工具条中“艺”按钮,选择平均值。

        iv)如果没有自动选择,则选择一列数值,按“Enter”键。这会给出数据的平均值。

        v)将光标放置到下一格。

        vi)按下标准一工具条中“艺”按钮,选择其他功能,然后选择STDEV。

        vii)如果没有自动选择,则选择一列数据,并按“Enter”键。就得出了数据的相应标准差,据此你可以将它换算成平均值的百分比,由此可知移液操作的准确性。

        注意事项

        分析

        l)比较每一个吸管的结果并评论其差别。

        a)准确性。

        b)时间。

        2)如何正确选择吸管?

        3)在移液的精度范围内可接受的误差是多少?

        4)绝对的准确性或一致性哪个更重要?

        来源:丁香实验

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