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        脱水培养基制备法

        相关实验:Mueller-hintot (MH) 琼脂平板制备实验

        最新修订时间:

        原理

        Mueller-Hinton琼脂由哈佛大学的John Howard Mueller和Jane Hinton共同开发,作为淋球菌和脑膜炎球菌的培养物,于1941年发表该方法。它通常包含:牛肉提取物:2.0克;酪蛋白的酸水解产物:17.5克;淀粉:1.5克;琼脂:17.0克。


        材料与仪器

        步骤

        1.将38克培养基(或上面列出的组分)悬浮在1升纯净水中。


        2.彻底混合。


        3.经常搅拌加热并煮沸1分钟以完全溶解组分。


        4.在121℃下高压灭菌15分钟。


        5.冷却至45°C


        6.将冷却的Mueller Hinton Agar倒入水平的水平表面上的无菌培养皿中,以获得均匀的深度。


        (注意:必须将板倾倒至4毫米的深度(对于100毫米板,大约25毫升液体琼脂,对于150毫米板,大约60毫升液体琼脂,但在任何情况下,测量深度为4毫米)。太浅的平板会产生错误的敏感结果,因为抗微生物化合物将比它应该进一步扩散,产生更大的抑制区。相反,浇注到> 4 mm深度的板将导致抗假结果。)


        7.在室温下固化。


        8.检查制备的Mueller Hinton琼脂,确保最终pH值在25°C时为7.3±1。


        (注意:如果pH值<7.2,某些药物似乎会失去效力(氨基糖苷类,喹诺酮类,大环内酯类),而其他药物似乎有过量活性(四环素)。如果pH> 7.4,则可能发生相反的结果。)


        9.准备好的介质可以在4到8°C的温度下储存。Mueller-Hinton琼脂从制备之日起约70天稳定。


        注意事项

        1.Mueller Hinton琼脂应至少每周用已知的生物菌株进行测试,以验证培养基和培养基是否按预期工作。


        2.Mueller Hinton琼脂培养基中添加5%羊血,可以用于测定抗菌药物的敏感性(如肺炎链球菌,脑膜炎奈瑟菌)。


        3.当对链球菌属物种进行药敏试验时,也可加入5%羊血和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸。这种类型也常用于弯曲杆菌的药敏试验。

        常见问题

        Mueller-hinton(MH)琼脂非常适合抗生素使用。首先,它是一种非选择性的非差别媒介。这意味着几乎所有镀在其上的生物都会生长。另外,它含有淀粉。已知淀粉吸收细菌释放的毒素,因此它们不会干扰抗生素。其次,它是一种松散的琼脂。与大多数其他平板相比,这允许抗生素更好地扩散。更好的扩散导致更真实的抑制区。

        来源:丁香实验

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