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        网织红细胞计数实验

        相关实验:网织红细胞计数实验

        最新修订时间:

        原理

        由于网织红细胞胞浆中还残存少量核蛋白体和核糖核酸(DNA)可被某些染料(如煌焦油蓝、新美蓝)染成蓝色颗粒和网状物质。故可区别于完全成熟的红细胞,(feticulocyte直径8-9.5cm)

        材料与仪器

        实验材料
        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        一、实验试剂:过去用煌焦油蓝,近来国外多用新美蓝溶液,因为后者网状物质着色较深,结果比较恒定,煌焦油蓝染色在不同标本间的差异较大.①、煌焦油蓝溶液:

        煌焦油蓝   0.4g         38g/L柠檬酸钠       20.0ml氯化钠       8.5g/L                      加水至100ml②、新美蓝溶液:

        新美蓝       1.0g         38g/L柠檬酸钠       20.0ml85g/L   NaCl                             加水至100ml

        二、实验操作:

        1、于小试管中加2-3滴新美蓝溶液或煌焦油蓝溶液再加血2-3滴,混合加塞。

        2、置37℃,15-20min。

        3、摇匀,取小滴推成片薄膜,干燥。

        4、选用低倍镜选择红细胞散在而分布均匀部位,然后油镜计数。

        5、为方便计数,需把视野缩小,可在目镜内放置一圆形硬纸,中央开一约2mm×3mm小孔。

        6.网织红细胞是有网状,细小点状或浅状蓝色物质的红细胞,计数1000个红细胞中含有的网织红细胞数,以10除之,即得网织红细胞的百数.

        注意事项

        l、网织红细胞必须在活体,染色条件下才能显示,染色与血液的比例以1:l为宜。

        2、血膜制备技术很重要,红细胞应均匀散开,如有重叠则影响结果的准确性。一般选择血膜的体尾交界处进行计数。

        参考植:成  人:0.008-0.02或(25-75)×109/L初生儿:0.020-0.06

        来源:丁香实验

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