• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        鸡胚培养法

        相关实验:病毒的培养方法实验

        最新修订时间:

        原理

        鸡胚培养方法操作简便,适用于流感病毒,痘病毒,疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种,即绒毛尿囊膜接种法,羊膜腔(羊水囊)接种法,尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不同目的采用适宜的接种方法。

        材料与仪器

        步骤

        1.  鸡胚的检查

        将9~11 日龄鸡胚置于检卵器上,照视观察鸡胚是否生活,根据①小血管是否清晰;②胚胎是否活动,观察小鸡的眼睛黑点是否移动。如果鸡胚不动,血管昏暗模糊,变黑或苍白都表示已死亡。

        2.  接种

        用铅笔标明天然气室及鸡胚位置,然后在绒毛尿囊膜发育区〈照视时呈现红色〉近胚位处的气室边缘作一记号,定为注射入口。

        用碘酒消毒注射入口和天然气室端的蛋壳,再用电钻,口腔科用牙钻和小锉刀,于注射入口和天然气室端的蛋壳上锯一小孔,勿伤及卵膜。

        用大头针通过火焰消毒后刺穿气室端所开小孔的卵膜,这样可避免在注射时液体回流出来。

        将鸡胚横卧于蛋架上,用无菌l 毫升注射器抽取病毒液体,针头与卵壳成30(交角,由注射器小孔剌入0.5~1.0 厘米,注0.1~0.2 毫升。

        注射完毕,用胶布封口,封口前胶布用碘酒消毒,并通过火焰烧去余碘,用过的注射器用煮沸法消毒,鸡胚放入35~37 ℃培养。

        注射后次日,逐日观察鸡胚生活情况,孵育48~72小时后移入4℃冰箱过夜。注意鸡胚必须直立,令气室端朝上。

        收获尿囊液之前取出鸡胚,用碘酒消毒气室端,并将镊子击破气室端卵壳,沿气室边缘小心打开一大缺口,然后用小镊子撕去卵膜及撕破绒毛尿囊膜,最后用毛细管吸取尿囊液,一般可吸得4~5 毫升。

        滴定尿囊液的病毒血凝效价。

        注意事项

        尿囊接种法适用于某些呼吸道病毒如流感,副流感,新城鸡瘟等病毒之培养,唯分离培养不如羊膜腔接种法的阳性率高。

        来源:丁香实验

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序