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        病毒的培养方法实验

        实验分类:

        微生物实验

        最新修订时间:

        简介

        病毒必须在易感的活细胞内才能增殖,因此,根据不同病毒选择敏感动物,离体组织细胞和鸡胚进行分离培养。

        来源:丁香实验

        操作方法

        鸡胚培养法

        1. 鸡胚的检查 将9~11 日龄鸡胚置于检卵器上,照视观察鸡胚是否生活,根据①小血管是否清晰;②胚胎是否活动,观察小鸡的眼睛黑点是否移动。如果鸡胚不动,血管昏暗模糊,变黑或苍白都表示已死亡。 2. 接种 用铅笔标明天然气室及鸡胚位置,然后在绒毛尿囊膜发育区〈照视时呈现红色〉近胚位处的气室边缘作一记号,定为注射入口。 用碘酒消毒注射入口和天然气室端的蛋壳,再用电钻,口腔科用牙钻和小锉刀,于

        动物接种法

        以无菌0.25 毫升注射器抽取脑炎病毒悬液0.1 毫升,去除注射器内的气泡。 取出小白鼠,左手将小白鼠固定,固定时用大拇指和食指握住小白鼠的头部,左手手掌轻轻按住小白鼠的体部,使其俯卧在桌面上右手以灭菌棉签蘸以碘酒,消毒小白鼠的右侧颞部皮毛。 右手拿注射器在小白鼠颞部(眼与耳根连线的中点略偏耳朵的方向)剌入,进入颅腔进针2~3 毫米,不要插得太深,注射量为0.02~0.03 毫升(不可超过0.

        组织培养法--原代细胞单层培养

        1. 原代细胞单层培养 原代细胞单层培养法,是指动物(包括脊椎动物和无脊椎动物)的组织自机体取出后,经胰酶或其他细胞分散剂消化处理,得到单个细胞悬液。以一定量接种到特定容器中,加入细胞生长所必需的营养液,置合适温度中经一段时间的培养,分散的单个细胞即贴附玻壁,开始分裂增殖并逐步长成均匀致密的单层细胞。 (1)取鸡胚:用碘酒棉球消毒气室端卵壳,再以酒精棉球消毒,然后以无菌镊子打开气室端卵壳,除去

        传代细胞培养法

        将成片细胞的生长液倒掉,用Hank's 液洗一次。 加入适量的0.1~0.25% 胰蛋白酶,37 ℃孵育1 分钟。 将细胞倒放,细胞在上,胰酶在下,继续孵育37 ℃5~10 分钟。 将胰蛋白酶倒掉,再加入原量的生长液,用10 毫升吸管吹打分散细胞。 用生长液按原量3-4 倍稀释,即一瓶细胞能传3-4 瓶。 病毒接种及CPE 观察: ①取已长成单层细胞的培养瓶二只,用无菌毛细滴管吸去管中

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