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        高效液相色谱法

        相关实验:动物组织中喳诺酮类残留量的测定方法实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        1.  前处理
         
        称取约2 g解冻试样,切成薄片并放入50 mL离心管中,加入20 mL 1%乙酸-乙腈溶液,均质1 min后放入超声波池中超声3 min, 4500 r/min离 心5 min,将上清液小心移入100 mL塑料离心管中,离心残渣用20 mL 1%乙酸-乙腈溶液再提取一次,合并上清液。
         
        将合并后的上清液用乙腈饱和正己烷25 mL脱脂净化,弃去上层溶液,下层液移至100 mL烧瓶中,于40 ℃水浴中旋转蒸发近干,用氮气吹干。在残渣中加入1 mLHPLC流动相,快速混匀和超声3  min溶解残渣。将溶解液转移至1 mL —次 性注射器中,通过注射器滤膜(0.45 um)过滤至HPLC进样小瓶中,进行HPLC 测定分析。
         
        2.  仪器参数液
         
        相色谱条件色谱柱:4.0 mm × 250 mm× 5 um, Hyprsil ODS;
         
        柱温:30 ℃;
         
        洗脱模式1: 0.01 mol/L磷酸盐-三乙胺缓冲液(pH3.0)(0.68 mL磷酸用水稀释至1 L,再用三乙胺调节酸度至pH3.0)。磷酸盐-三乙胺缓冲液-乙腈(80 + 20)混合,流速:1 mL/min。
         
        洗脱模式2: 梯度洗脱,流速 0.8 mL/min。
         

        来源:丁香实验

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