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        巨噬细胞的吞噬作用

        相关实验:细菌的致病性与宿主非特异性免疫实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        1.  试验前一天,给小鼠腹腔注射2%淀粉水溶液l ml,使巨噬细胞从腹膜血管渗到腹腔。

        2. 制备2%鸡红细胞悬液l:取抗凝的鸡血2 ml加生理盐水8-l0 ml,混匀2000 rpm离心沉淀5  min,吸弃上清,同法再洗二次,末次2000 rpm离心沉淀10 min吸弃上清。吸压积的红细胞0.2 ml加入9.8ml生理盐水中,混匀后即为2%鸡红细胞悬液。

        3.  24小时前注射淀粉的小鼠,腹腔注射2%鸡红细胞悬液1 ml。轻揉腹部,30 min后用颈椎脱臼法使小鼠死亡。死后立即剖开腹腔,用滴管吸出腹腔液滴在玻片上,每片约0.2 ml。

        4.  把玻片放入37 ℃温箱中孵育30 min。

        5.  取出玻片,用pH6.4的PBS轻轻冲洗玻片。巨噬细胞,中性粒细胞等吞噬细胞在孵育过程中已粘附在玻片上,轻轻冲洗不掉,其他非吞噬细胞则大部分被冲洗掉。

        6.  用吹风机立即吹干,姬姆萨一瑞氏染色。

        7.  结果:可见鸡红细胞被巨噬细胞吞噬。巨噬细胞及鸡红细胞的胞浆被染成淡红色,核为紫兰色。被吞噬的鸡红细胞尚未消化者,胞浆和核很清晰;刚开始消化的,胞浆色变浅,界限不清;消化后的胞浆消失,仅留下紫色的核或浅紫色的核轮廓。 

        注意事项

        大小吞噬细胞的吞噬作用有何异同?

        来源:丁香实验

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