• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        辅助法

        相关实验:固体培养基上细菌培养实验

        最新修订时间:

        原理

        大肠杆菌的许多菌株在穿刺瓶中可以保存数年,在-70 °C则可以无限期保存。

        材料与仪器

        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        一、穿刺保存

        1.  在一个耐高压的带有橡皮塞或Teflon盖的气密性小瓶中加人2/3体积穿刺培养基。

        2.  挑取一个单菌落,反复将接种环深刺人琼脂中。

        3.  拧松盖子,于37 °C培养(8~12 h )直到在穿刺孔迹中的细菌生长至可见的雾状。

        4.  拧紧盖子于15~22 °C存放于暗处。

        5.  按以下方法复苏菌株

        用一支无菌接种环挑取一些带有细菌的琼脂,然后涂布于LB
        平板上并划线以得到单菌落。

        二、冷冻保存

        1.  将2 ml对数生长中期培养液或1 ml新鲜饱和的培养液加人到一穿刺小瓶或Nunc小瓶中,这些小瓶中已装有1 ml甘油溶液或含7%二甲基亚砜(DMSO)。

        最好使用反应级别或分光光度学级别的DMSO作为冻存液,因为这样的试剂在存储时通常盖得很严实。

        2.  保存于 -20°C或 -70°C。
         
        于-70°C保存时,大多数菌株可保持更长的存活时间。

        3.  复苏时,用一无菌牙签或吸管刮取固体冰碴片,然后在LB平板上划线。仔细操作不要让其融化。

        来源:丁香实验

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序