• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        比色法

        相关实验:磺胺药的药代动力学参数测算实验

        最新修订时间:

        原理

        磺胺类药物能与某些试剂发生反应生成有色物质,通过比色可以对其血浓度进行定量检测。酸性环境下,磺胺类药物苯环上的氨基(-NH2)离子化生成铵类(-NH3+)化合物,与亚硝酸钠发生重氮化反应,生成重氮盐(-N=N+-)。这种化合物在525 nm波长下比色,其光密度与磺胺类药物的浓度呈正比。

        药代动力学:研究药物在体内转运和转化的动力学规律。通过观察用药后血药浓度的变化(时量曲线),研究药物从血浆中消除的速率,并以房室模型描述其规律,指导临床用药、调整用药剂量和给药间隔时间。

        材料与仪器

        步骤

        1.  麻醉,分离颈动脉。耳缘静脉注射肝素抗凝后,颈动脉插管,取动脉血备用。

        2.  取血:先取空白动脉血。然后给家兔耳缘静脉注射磺胺嘧啶(SD,0.3 g比色法),分别于注射后0、3、5、15、30、45、60、90 min 时取动脉血。

        3.  测定血药浓度:严格按照下表中的顺序加药:

         
        比色法
         
        根据标准管的药物浓度及其光密度值,可计算出样品管内的药物浓度。公式如下:

        OD 样/OD 标 = C 样/C 标

        将所测得的血药浓度值与时间通过计算机进行曲线拟合,得到药时曲线,表达公式如下:

        Ct = Ae-αt + Be-βt

        其中,
        Ct:时间t后的血药浓度
        A:分布开始时的血药浓度;
        α:分布速率常数;
        B:消除开始时的血药浓度;
        β:消除速率常数。

        在半对数坐标纸上以时间(t)为横坐标,实测的光密度值换算而得的血药浓度的对数为纵坐标,绘制时量曲线图。 

        注意事项

        1.  加取血样的吸量管为同一只,因此应先取空白血样,分别加到对照管和标准管中后,再从注射后90min 时的血样开始取起,然后是注射后60、45、30、15、5、3、0 min 的血样。

        2.  每只试管内,先加三氯醋酸,再加入血样,加完血样后立即振荡,否则会很快发生凝固,影响结果的准确性。

        3.  显色剂的顺序一定不能错:亚硝酸钠→麝香草酚。

        4.  SD的血药浓度单位为μg/ml。

        来源:丁香实验

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序