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        固体培养基

        相关实验:细菌基础培养基制备实验

        最新修订时间:

        原理

        培养基是人工合成的一种混合营养料,用于分离培养细菌。常用的有基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基等。

        材料与仪器

        步骤

        一、普通琼脂培养基
         
        于pH 7.6-7.8 的肉膏汤中加入2%-3%琼脂,加热溶化(必要时用脱脂棉过滤后再补足水分)适量分装于适当的试管或三角烧瓶中,塞上硅胶塞并用牛皮纸包扎,置高压灭菌器内103.4 kpa、121.3℃、20 分钟灭菌。
         
        1.  琼脂斜面:分装于试管中的琼脂培养基,由高压灭菌器内取出后,趁热将试管斜置冷凝后即成琼脂斜面(或称普通斜面)。
         
        2.  琼脂平板:分装于烧瓶中的琼脂培养基,由灭菌器内取出后,待冷却至50-60℃时,以无菌操作倾入无菌平皿内(直径9 cm 的平皿,约需13-15ml 琼脂培养基),冷凝后即成琼脂平板(或称普通平板)。

        二、血液琼脂培养基
         
        有些细菌营养要求较高,在普通琼脂培养基生长不良,可用血液琼脂培养基进行培养。将已灭菌的琼脂培养基于50℃时,以无菌操作加入无菌的5%-10%脱纤维羊血(或兔血),摇匀后分装于无菌试管,斜置冷凝后即成血液琼脂斜面;分装于无菌平皿,摇匀后冷凝即成血液琼脂平板(简称血平板)。将以上固体培养基(平板应底朝上)放入37℃温箱24 小时培养,如无菌生长,放凉后即可保存冰箱备用。平板可用于细菌分离培养,斜面可用于增菌和保存菌种等。

        三、半固体培养基
         
        于pH7.6的肉膏汤种加入0.3%-0.5%琼脂,加热溶化,脱脂棉过滤后补足水分,适量分装于试管内,经103.4 kpa、121.3℃、20 分钟高压灭菌,取出直立,待琼脂凝固后,即成为半固体培养基,37℃温箱培养24 小时无菌生长,即可应用。常用于观察细菌动力和保存菌种。

        来源:丁香实验

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