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        人工灌流法

        相关实验:强心苷对离体蛙心的作用实验

        最新修订时间:

        原理

        青蛙的心脏离体后,把含有任氏液的蛙心套管插入心室,用这种人工灌流的方法保持心脏新陈代谢的顺利进行,以维持蛙心有节律地收缩和舒张。通过生物信号处理系统,记录心脏搏动情况。本实验采用离体蛙心,观察强心苷的强心作用。

        材料与仪器

        步骤

        一、方法

        ⒈  离体蛙心的准备(如图6-1)

        ⑴破坏大脑、脊髓,仰位固定于蛙板上。

        ⑵剪开胸廓、心包膜暴露心脏,结扎右主动脉(A),于左主A穿线备用。

        ⑶于左主A 剪一“V”形小口,将有任氏液的蛙心套管插入,并在心脏收缩时通过主A 球,转向左后方插入心室,见到套管内的液面随着心搏上下波动后,将松结扎紧并固定在套管的小钩上。用滴管吸去套管内血液,,换2~3 次任氏液洗净余血,以防止血块堵塞套管。剪断主动脉,持套管提起心脏,自静脉窦以下把其余血管一起结扎(切勿伤及或结扎静脉窦),分离周围组织,在结扎处下剪断血管,离体出心脏。再用任氏液连续换洗,至无血色,使插
        管内保留1.5ml 左右的任氏液。
         
        人工灌流法
        图 6-1straub 法插管插入要点示意图(a)和(b)装置

        ⒉  实验装置的准备

        ⑴将蛙心套管固定于铁架台,用带有长线的蛙心夹在心舒期夹住心尖部,将长线连于张力换能器。

        ⑵打开电脑及BL-420系统→输入信号或实验项目→循环实验(C)→蛙心灌流⑴。

        ⑶开始实验(此时启动自动记录)→速度调节为4 或8s/dir→记录正常曲线,张力调至0.5~1 g。(实验过程不要随意点击记录的红色圆点,否则会中断记录)。

        ⒊  按下列顺序给药

        ⑴描记一段正常曲线。

        ⑵用滴管吸出套管内任氏液,换成等容积无钙任氏液,观察曲线有何变化。

        ⑶当心脏收缩显著减弱时,向套管内加入1:500 洋地黄毒苷0.2 ml,如作用不明显,再加入1:250 洋地黄毒苷0.2 ml。

        ⑷当作用明显时,再向套管内加入1%氯化钙溶液2—3 滴。比较每次加药后心脏收缩的振幅和频率。

        ⒋  实验结束单击“■”停止试验→输文件名→保存→反演→压缩→图形剪辑。

        ⒌  相关内容设置(S) 实验标题(H)→实验人员(P)→实验相关数据(R)。

        ⒍  打印设置文件→打印预览(V)→4 张/组→打印设置(R)→属性(P)→自定义(S)
        省墨→打印(P)→打印份数(C)。
         
        二、结果

        进行图形分析。

        注意事项

        ⒈ 本实验以青蛙心脏为好。因蟾蜍皮下腺体有强心苷样物质,可降低对强心苷的敏感性。

        ⒉ 蛙心套管一定要插入心室。切勿用力过大,插入过深,损伤心肌。

        ⒊ 结扎静脉时,要远离静脉窦(起博点)。

        ⒋ 换液时,任氏液的量要恒定,注意避免空气进入心脏。加药时用吸管充分混匀。

        ⒌ 在整个实验过程中应保持套管内液面高度不变,以保证心脏固定的负荷。

        ⒍ 在实验过程中,基线的位置、放大倍数、描记速度应始终一致。

        常见问题

        一、强心苷对心脏有什么作用?

        二、由实验结果分析强心苷的作用特点。

        来源:丁香实验

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