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        选择性培养法

        相关实验:阿须贝氏培养基分离好氧性自生固氮菌实验

        最新修订时间:

        原理

        选择性培养是一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养,具有使混合菌中的劣势发展成优势菌的功能,故被广泛用于菌种筛选等领域。阿须贝氏(Ashby)无氮培养基是一种缺之结合态无机或有机氮源的培养基,可有效从土壤中分离自生固氮菌。阿须贝氏(Ashby)无氮培养基选择的原理是自生固氮菌在保证碳源(甘露醇或葡萄糖)和无机营养供应的情况下,可利用空气中的游离氮合成自身需要的含氮有机物,而其他各类微生物多无自生固氮能力,因此达到了选择性富集的效果。
         
         

        材料与仪器

        步骤

        一、 采集土样

        用小铲铲取稍干的10 cm深和20 cm深的土壤样品约1克,适当研碎;
         
        二、 准备平板

        将阿须贝氏培养基加热融化,待冷至50 ℃左右倒数个平板,冷却待用;
         
        三、纸板布土

        将土样倒在约15 cm×15 cm 大小的毛面硬纸板上,摇动几下,轻轻倒去颗粒较大的土样;
         
        四、弹土接种

        把纸板沾土的面朝向平板并盖上,随即用手轻轻弹数下.然后移去纸盖上皿盖;
         
        五、保温培养

        将培养皿平板倒置后放入28 ℃恒温中培养4-7 d;
         
        六、观察菌落

        凡出现大型、黏稠、半透明,颜色呈白色、褐色或黑褐色的菌落,一般都是好氧性固氮菌。
         
        七、分离纯种

        可用平板划线分离法进行菌种纯化。

        来源:丁香实验

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