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        基本方案

        相关实验:线粒体的活体染色实验

        最新修订时间:

        原理

        活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯绿 B是线垃体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色,而在周围的细胞质中染料被还原,成为无色状态。

        材料与仪器

        步骤

        一、方法

        1.  用空气栓塞处死兔子,置于解剖盘内,迅速打开腹腔。

        2.  取兔肝边缘较薄的肝组织一小块(2~3 mm3),放入盛有Ringer氏液的平皿内洗去血液(用镊子轻压)。

        3.  用吸管吸去Ringer氏液,在平皿内加1/300詹纳斯绿B染液,让组织块上表面露在染液外面,使细胞内线粒体的酶系可进行充分的氧化,这样才有利于保持染料的氧化状态,使线粒体着色。

        4.  当组织块边缘染成篮色时即可,一般需要染30分钟。

        5.  染色后,将组织块移到载片上,用镊子将组织块拉碎,就会有一些细胞或细胞群从组织块脱离。

        6.  将稍大的组织块去掉,使游离的细胞或细胞群留在载片上,加一滴Ringer氏液,盖上盖片,吸去多余水分。

        二、结果

        显微镜观察,肝细胞质中许多线粒体被染成蓝绿色,呈颗粒状。

        来源:丁香实验

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