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        抗红细胞抗体(溶血素)的制备

        相关实验:抗原和免疫血清的制备实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        实验材料
        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        1.  红细胞悬液的制备

        (1) 采血
        采取的绵羊血与灭菌的保存液等量混合,置冰箱中,可保存数周,也可用抗凝方法

        (2) 洗涤血球
        先将抗凝血液离心沉淀(2000 cpm×5分钟)吸去上清。加入2~3倍的生理盐水并用毛细滴管反复吹打混匀,离心沉淀5分钟,吸去上清液。如此连续洗3次,最后一次可离心沉淀10分钟以使血球密集管底。直至上清液透明无色再吸去上清夜,留密集血球备用。洗涤4次则血球变脆不适于使用。

        (3) 用生理盐水将红血球配成需要浓度,即为试验用的血球悬液。如需10%血球悬液时,则吸取1毫升洗涤后的红血球加生理盐水9毫升即成。

        2.  免疫方法

        (1) 选择2~3千克健康雄兔,按如下剂量及程序免疫:
        抗红细胞抗体(溶血素)的制备

        (2) 末次注入后7天,耳静脉采血1毫升,滴定血液单位达1:2000以上可颈动脉放血,分离血清,放等量甘油防腐,分装无菌安瓶,贮于4℃中备用。

        来源:丁香实验

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