抗原和免疫血清的制备实验

1. 抗原的制备： 标准菌株的选择：所用的菌种伤寒杆菌H901和伤寒杆菌O901应具有典型形态菌落及生化反应。在生理盐水中不发生自身凝集，与特异血清有高度凝集者可作为菌种。 2. 菌液的制备 （1）原液制备： H菌液的制备：将合格的伤寒杆菌H菌株接种于普通琼脂的克氏瓶或大试管内 37℃孵育18—24小时。肉眼观察有无杂菌生长，必要时作镜检。用无菌甲醛生理盐水洗下菌苔，将

1. 红细胞悬液的制备 （1） 采血 采取的绵羊血与灭菌的保存液等量混合，置冰箱中，可保存数周，也可用抗凝方法 （2） 洗涤血球 先将抗凝血液离心沉淀（2000 cpm×5分钟）吸去上清。加入2~3倍的生理盐水并用毛细滴管反复吹打混匀，离心沉淀5分钟，吸去上清液。如此连续洗3次，最后一次可离心沉淀10分钟以使血球密集管底。直至上清液透明无色再吸去上清夜，留密集血球备用。

1. 弗氏佐剂的制备 将羊毛脂与石蜡油按1：5比例混合，高压灭菌。 2. 人血清—弗氏完全的制备 将灭菌佐剂一份置研钵中，边研磨边滴加等量的含卡介苗3—4毫克/毫升的抗原液，使成油色水乳剂，研磨要充分，使乳剂滴入冰水中不扩散。 3. 免疫动物 可采用一次性免疫法，即将抗原与佐剂制成的乳剂分多个点兔背部皮肤，也可注入足底2~4针各0.45毫升，总量约3毫升，一个月后试