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        备选方案1(单抗上清大量制备)

        最新修订时间:

        材料与仪器

        实验材料
        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        1.  重复基本方案1步骤1,按1:10分传到终体积100 ml 的完全DMEM-10/HEPES中。
         
        2.  准备传代细胞时,应将175 cm2培养瓶中的内容物(100 ml)转移到—个850 cm2旋转培养瓶中,另加150 ml 完全DMEM-10/HEPES,盖紧瓶盖,置于转瓶培养装置上于37℃培养1~2天。
         
        3.  用饱蘸70%乙醇无菌海绵擦拭旋转培养瓶的瓶盖和瓶颈,打开瓶盖,加250 ml 完全DMEM-10/HEPES,盖紧瓶盖,再在转瓶装置上培养1~2天。

        4.  如步骤3所述擦拭瓶盖及瓶颈。打开转瓶,加大约2 L 的完全DMEM-10/HEPES,加至几乎满瓶(根据转瓶容量计,总体枳大约2.5 L),盖紧瓶盖,并置转瓶培养装瓶上, 37℃培养直至培养液变黄色(大约5天)。
         
        5.   将培养液倒入无菌的250 ml 的锥形离心管中,室温下250 g 离心20 min,收集上清, 弃沉淀,将上清分装成数管冻存。

        来源:丁香实验

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