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        细菌细胞壁的染色法

        相关实验:细菌细胞壁的染色实验

        最新修订时间:

        原理

        根据细菌细胞在高渗溶液中或用乙醚蒸气处理后,会产生质壁分离这一现象,经染色后也可在普通光学显微镜下区分细胞壁和细胞质膜。

        材料与仪器

        步骤

        1.  单宁酸法

        (1)将培养16~18小时的巨大芽孢杆菌按常法制成涂片。

        (2)用5%单宁酸染5分钟后,水洗。

        (3)用0.2%结晶紫染3~5分钟,水洗,吹干。用油镜观察,细胞壁呈紫色,细胞质呈淡紫色。

        2.  磷钼酸法

        (1)制备浓厚的涂片,在未干时浸入1%磷钼酸水溶液3~5分钟。

        (2)用1%甲基绿水溶液染3~5分钟。

        (3)水洗后,吹干,用油镜观察。细胞壁为绿色,细胞质无色。

        3.  区分细胞壁与细胞质膜

        (1)乙醚蒸气法

        ①将巨大芽孢杆菌涂布于盖玻片上,翻转盖玻片使其放在乙醚蒸气瓶的瓶口上蒸3分钟。

        ②取下盖玻片置Bouin氏固定液中30分钟后取出,水洗。

        ③用硫堇染色30秒钟。

        ④水洗,水封,置油镜下观察。

        (2)NaCl法

        ①取一滴25%NaCl溶液于洁净的载玻片上。

        ②挑一小环培养6小时的枯草芽孢杆菌,在25%NaCl水滴中涂布均匀,待自然干燥。

        ③滴加0.01%结晶紫于其上,使盖满有菌部分,30秒钟后水洗,干燥,用油镜观察结果。

        来源:丁香实验

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