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        细胞生长曲线

        相关实验:细胞生长曲线实验

        最新修订时间:

        原理

        细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法,是判定细胞活力的重要指标。一般细胞传代之后,经过短暂的悬浮然后贴壁,随后度过长短不同的潜伏期,即进入大量分裂的指数生长期。为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化,典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期,斜率较大的指数生长期,呈平台状的平顶期及退化衰亡4个部分。细胞生长曲线的测定一般可利用细胞计数法进行。

        材料与仪器

        步骤

        1.  取生长状态良好的细胞,采用一般传代方法进行消化,制成细胞悬液。

        2.  计数,精确地将细胞分别接种于21~30个大小一致的培养瓶内或培养孔(以24孔培养板为宜),每瓶或孔细胞总数要求一致,加入培养液的量也要一致。

        3.  每天或每隔一天取出3瓶(孔)细胞进行计数,计算均值。培养3~5 d 常要给未计数的细胞换液。

        4.  以培养时间为横轴,细胞数为纵轴(对数),描绘在半对数座标纸上,连接成曲线后即成该细胞的生长曲线。

        注意事项

        1.  细胞生长曲线虽然最为常用,但有时其反映数值不够精确,可有20~30%的误差,需结合其它指标进行分析。


        2.  现在很多实验室利用培养板采用MTT法进行生长曲线测定,较为简便。

        常见问题

        1.  标准的细胞生长曲线近似“S”形,一般在传代后第一天细胞数有所减少,再经过几天的潜伏适应期,然后进入对数生长期,达到平台期后生长稳定,最后到达衰老。


        2.  在生长曲线上细胞数量增加1倍时间称为细胞倍增时间,可以从曲线上换算出。

        来源:丁香实验

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