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        PVDF膜上蛋白的可逆染色

        相关实验:PVDF 膜上蛋白的可逆染色

        最新修订时间:

        原理

        丽春红带负电荷,可以与带正电荷的氨基酸残基结合,同时也可以与蛋白质的非极性区相结合,从而形成红色的条带。

        材料与仪器

        步骤

        1.  氨基黑染色


        染液:0.5% Amido Black (w/v), 25% isopropa nol (v/v) and 10% acetic acid.


        染色:将 PVDF 膜置于染液中染色数钟,ddH2O脱色。


        2. 考马斯亮蓝染色


        染液:0.1% Coomassie Brillia nt Blue R-250 (w/v) and 50% met hanol (v/v)


        脱色液:40% met hanol (v/v) with 10% acetic acid (v/v)


        染色:将 PVDF 膜置于染液中染色 15 min.,脱色液脱色。


        3.丽春红染色 Ponceau S


        染液:0.2% w/v Ponceau S in TCA (3% v/v)


        染色:将 PVDF 膜置于染液中染色 5min


        脱色:ddH2O脱色

         

        注意事项

        丽春红染色液不适用于尼龙膜上蛋白的检测。

        常见问题

        丽春红的染色灵敏度不如考马斯亮蓝染色液。

        来源:丁香实验

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