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        番茄叶和根二维差异凝胶电泳(DIGE)实验

        实验分类:

        植物学实验

        最新修订时间:

        简介

        我们可以通过双向荧光差异凝胶电泳(Two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis,2D-DIGE)来分析同一植物两个不同组织器官蛋白的差异表达。

        原理

        这个方法包括收集成熟番茄的叶和根,从收集的组织中制备蛋白质提取物,在差异凝胶电泳前荧光标记样本,一维和二维电泳分离以及图像定量差异蛋白表达量。

        来源:植物蛋白质组学实验指南

        操作方法

        番茄叶和根二维差异凝胶电泳(DIGE)

        3.1 叶和根组织的收集和沉淀蛋白 ( 1 ) 从植物的中部切取绿色叶片,迅速放入塑料袋里冷却。如果没有冰箱,可先放到冰上,再放入 -20°C 保存。 ( 2 ) 对于根部组织,从茎部下面切一寸的根,摇晃根部并迅速放入水中洗掉泥土,连续洗 3 次,然后再迅速放入塑料袋里速冻或放在冰上暂时保存。 ( 3 ) 称取 2.5 g 速冻的根及叶组织,除去多余的茎及其他杂质,用预冷的剪刀将 这些组织剪

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