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        蛋白质合成实验

        实验分类:

        细胞实验

        最新修订时间:

        简介

        比色法可测定在任何一个时间点上的总蛋白量。在一定时期内连续观察可以用来测 定净蛋白质的累积或丟失(也就是合成的蛋白质—降解的蛋白质)。此时蛋白质合成 可以用放射标的氨基酸与细胞孵育来进行液闪测定,诸如 3H -亮氨酸或 35S-甲硫氨酸,所测定的是掺入到 106 个细胞或是某一段时间内每克蛋白质中的放射活性。

        来源:动物细胞培养:基础技术指南第五版

        来源:丁香实验

        操作方法

        方案21.6 蛋白质合成实验

        材料 无菌 细胞培养,如 1X104~ 1X106 个细胞,24 孔板 3H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (~50uCi/ml) (特异活性并不重要,因为它将由培养基中的亮氨酸浓度决定) 非无菌 SLS 或 SDS,1% (35m mol/L ) 溶于 0 .3 mol/L NaOH 三氯醋酸(TCA) 液闪瓶 Eppendorf 管 闪烁液

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