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        病毒中和实验

        实验分类:

        微生物实验

        最新修订时间:

        简介

        中和试验 (neutralization test)是在体外适当条件下孵育病毒与特异性抗体的混合物,使病毒与抗体相互反应,再将混合物接种到敏感的宿主体内,然后测定残存的病毒感染力的一种方法。凡是能与病毒结合,并使其失去感染力的抗体称为中和抗体。因为病毒要依赖于活的宿主系统复制增殖,因此,中和试验必须在敏感的动物体内(包括鸡胚)和细胞培养中进行。中和试验的优点是敏感性和特异性高,中和抗体在体内存在时间长,大多数病毒的中和抗体与免疫力有直接关系。中和试验的缺点是要使用活的宿主系统,病毒对宿主系统产生作用需要一定的时间,因而出结果慢。


        中和试验的应用很广泛,主要应用于以下几个方面:①鉴定病毒;②分析病毒抗原的性质;③测定免疫血清的抗体效价和疫苗接种后的效果;④测定病人血清中的抗体,用于诊断病毒性疾病。来源:《病毒学检验》

        来源:丁香实验

        操作方法

        固定病毒-稀释抗血清法

        (以细胞培养为例):①用细胞维持液连续倍比稀释急性期和恢复期血清;②取1. 0 ml 不同浓度的稀释血清分别与 1. 0 ml 标准病毒 (100 CCID50/0. 1 m) 混合,置 37℃水浴作用1 h;③取混合液 0. 2 ml 分别加到细胞已长成单层的 96 孔细胞培养板中,每一稀释度接种 4孔细胞。同时设 4孔正常细胞对照和设 4 孔 100 CCID50/0. 2 ml 作病毒对照;

        固定抗血清-稀释病毒法

        (以细胞培养为例):①用细胞维持液连续 10倍稀释病毒分离物10-1~10-8); ②取 0. 6ml不同浓度的病毒稀释液与 0. 6 ml 标准的抗病毒血清混合;③再取 0.6ml 不同浓度的病毒稀释液与 0. 6 ml 已知的阴性血清混合;④将混合液置 37℃ 水浴1h, 然后取 0. 2 ml 混合液分别接种于细胞已长成单层的 96孔细胞培养板中,每一稀释度接种 5孔,设 5 孔正常细胞对照

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