荚膜染色实验

实验分类：

微生物实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本实验介绍 3 种荚膜染色法：湿墨水法、干墨水法和Anthony 氏法。其中湿墨水法较简便、并适用于各种有荚膜的细菌。

来源：《微生物学实验（第三版）》

来源：丁香实验

操作方法

湿墨水法

1. 制备菌和墨水混合液加一滴墨水于洁净的载玻片上，然后挑取少量菌体与其混合均匀。2. 加盖玻片将一洁净盖玻片盖在混合液上，然后在盖玻片上放一张滤纸，轻轻桉压以吸去多余的混合液。3. 镜检用低倍镜和高倍镜观察，若用相差显微镜观察效果更好。背景灰色，菌体较暗，在藏体周围呈现明亮的透明圈即为荚膜。

干墨水法

1. 制混合液加一滴 6％葡萄糖液于洁净载玻片的一端，然后挑取少量菌体与其混合，再加一环墨水，充分混匀。2. 涂片另取一端边缘光滑的载玻片作推片，将推片一端的边缘置于混合液前方，然后稍向后拉，当推片与混合液接触后，轻轻左右移动，使之沿推片接触的后缘散开，尔后以大约 30° 角迅速将混合液推向玻片另一端，使混合液铺成薄层（图 IV-4）。3. 干燥空气中自然干燥。4. 固定用甲醇浸没涂片固定一分钟

Anthony 氏法

1. 涂片按常规取菌涂片。2. 固定空气中自然干燥令不可加热干燥固定。3. 染色用 1％的结晶紫水溶液染色 2 min。4. 脱色以 20％的硫酸铜水溶液冲洗，用吸水纸吸干残液。5. 镜检干后用油镜观察。菌体染成深紫色，菌体周围的荚膜呈淡紫色。