菌株的构建和四分体孢子的分析实验

1）挑YPD或选择性平板上的酵母菌单菌落接种在孢子形成平板上。如果无需选择的话，细胞在转移到孢子形成平板之前，可以在YPD平板上先培养几天。单个菌落在YPD平板上生长3〜4天，而对成小块细胞来说，可在YPD平板上生长2天。这种预生长并 非必需的，但它可以使孢子形成的效率更高些。在转移酵母细胞时，应用少量细胞在孢子形成平 板上涂布相对较大的面积（约1cm2),不应见到成团的接种物。2）于25℃培养4

1）在合适的培养容器中，加入YPD培养基培养，待形成孢子的二倍体细胞生长至 OD600为 2.5〜3.0 (约为 8×107 细胞/mL)。2)转移1 mL培养液至一支无菌15 mL聚丙烯试管中，1200 g离心5 min。3)倒去上清，用5 mL无菌水重悬细胞，涡旋振荡使细胞充分悬浮，再按步骤2离心。4)倒去上清，细胞用1 mL添加了特定二倍体细胞所需营养成分的孢子形成液体培养基悬浮。5）于30