微生物污染的排除实验

实验分类：

微生物实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

细胞受各种霉菌、细菌和支原体污染后，一般都较难排除或杀灭，其中以支原体更难排除，因此从预防着眼为上。内容来源：组织培养和分子细胞学技术。（北京出版社）

来源：丁香实验

操作方法

抗生素除菌法

最近报道应用以 4-氟，2-羟基喹啉（Ciprofloxacin：Cip）、截耳素衍生物（Pleu—romutilinDeriyative：BM—Cyclin2：BM—1）和四环素衍生物（BM-2）等三种抗生京抑制支原体效果很好，这三种抗生京单用或合用都能有效地杀灭支原体，其法如下（以BM-1和MB-2 为例） 1. 抗生素制备均可用PBS配成250×浓缩液－20 ℃备用；

加温除菌法

根据支原体对热耐受性差的特点，有人把受污染的细胞置41 ℃中作用5~10 小时，最长可达18 小时，以杀灭支原体。

巨噬细胞吞噬法

从动物腹腔采取巨噬细胞，为排除其它细胞成分。可先进行纯化。然后再加入被支原体污染的细胞培养液中混合培养。在培养过程中，为检验支原体是否已被消除干净，可利用支持物培养法验证；取出支持物逐日染色、镜检观察，至支原体已被消除干净为止。

动物体内接种除菌法

把受支原体污染的肿瘤细胞可接种在同种动物皮下或腹腔中，借动物免疫系统消灭支原体，而肿瘤细胞却能在体内继续生长，待—定时间后，从体内取出细胞再进行培养繁殖。但此法稍繁琐，按同一原理也可在体外进行。