蛋白质与溴化氰活化的琼脂糖结合实验

生物化学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

这是一种将酶或蛋白质如过氧化物酶或抗体，共价固定在琼脂糖或交联葡聚糖的有效方法。这种方法的严重不足是所用试剂毒性很高，推荐使用从公司购买的产品（如 CNBr-活化的琼脂糖）。由于活化需在强碱条件下进行，凝胶的结构有可能被损坏，因此要快速进行。

来源：《酶学实验手册》

来源：丁香实验

操作方法

基本方案

实验所需「试剂」具体见「其他」1. 制备 CNBr-活化的琼脂糖 4B以下步骤必须在通风橱中小心进行。用 3 mol/L NaOH 将琼脂糖 4B 悬液调整为 pH 11.2，用 pH 计进行检测。在天平上放置一烧瓶，重量归零，将 0.67 g 固体 CNBr 溶解在少量水中，小心塞住烧瓶口。边搅拌（KPG 或螺旋搅拌器，不要用磁力搅拌器）边将 CNBr 溶液小心加入凝胶悬液中，持续保持 pH 1