碱性磷酸酶的测定实验

实验分类：

生物化学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

正磷酸单酯磷酸水解酶（最适碱度）。

正磷酸单酯＋H₂O → 醇＋P_i

这个酶可以从各种渠道得来，如细菌和哺乳动物肠黏膜。每个酶分子有两个 Zn^2＋离子键。碱性的磷酸酶频繁地与抗体配位，例如在 Westernblots 中及酶联免疫鉴定（ELISA）中。细菌酶的最适 pH 是 8.0，哺乳动物的要较高一点（9～10）。依照反应方案，以下的实验步骤用到了增加黄色的着色强度。

对磷酸硝基苯＋H₂O →对硝基酚＋P_i

另外，邻羧苯磷酸在碱性介质中可以用作酸性磷酸酶。

来源：丁香实验

操作方法

哺乳动物碱性磷酸酶

实验所需「试剂」具体见「其他」0.02 ml 酶样品25 ℃ 时于 405 nm 处吸收值降低，ε405＝18.5×103 l/（mol·cm）。

细菌碱性磷酸酶

实验混合物25℃ 时，于 405 nm 处吸收值降低，ε405＝18.5×103 l/（mol·cm）。