整合膜蛋白在单室脂质体中的无细胞翻译实验

实验分类：

其他实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

膜蛋白提供了相应的分子机制，使得有用的分子能够可控地进入细胞，并且允许细胞内的产物输出到胞外。细胞膜上的酶合成了组成细胞膜的分子 (如饱和与不饱和脂肪酸、憐脂、甘油酯、鞘脂、甾醇、聚异戊二烯）。细胞膜上的酶复合物负责电子传递, 产生电化学梯度』而精细的细胞膜 A T P 酶马达利用这些梯度产生 A T P 。膜蛋白还能收集光, 提供变构的受体而将外部分子与细胞膜的结合信息通过信号级联转导为细胞反应; 在胚胎干细胞分化组装为更复杂的组织时提供必需的表面接触; 帮助激发针对病原体感染的抗原反应等。
作者：伯吉斯等,主译：陈薇，本实验来自「蛋白质纯化指南」

来源：丁香实验

操作方法

整合膜蛋白在单室脂质体中的无细胞翻译实验

基因克隆这一方法需要两步 PCR (Blommel et al.,2006;Thao et al.,2004)。图 37.2 提供了pEU-HSCB 的载体图谱和用于克隆 His6-细菌视紫红质的引物设计例子 (Blommel andFox，2007)。使用这一载体和引物设计方案，T E V 蛋白酶能够切MGHHHHHHAIAENLYFQ 序列，从而丝氨酸成为成熟蛋白质的第一个