嗜菌体 ΦC31 整合酶介导的位点特异性整合实验

实验分类：

其他实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

有效地传递ΦC31整合酶和供体质粒到感兴趣的受体组织或细胞仍然是这一整合系统中最具挑战性的内容。不像利用病毒的方法对基因组进行操作，用 ΦC31整合酶几乎总是需要一个额外的方法来刺激细胞对DNA 的摄取。然而,相对简单的质粒系统意味着几乎所有已证明的可行的导人外源DNA 进入细胞的方法都能够用 ΦC31整合酶来实现。事实上，多种转染技术有时显示出适合于这方面的应用。
作者：T.弗里德曼等,译者：殷勤伟等，本实验来自「基因转移」

来源：丁香实验

操作方法

嗜菌体 ΦC31 整合酶介导的位点特异性整合实验

用细菌嗜菌体ΦC31 整合酶进行的位点特异性整合材料试剂琼脂糖和上样缓冲液细胞：永生化哺乳动物细胞系或原代细胞 D N A 连接酶和合适的连接缓冲液 D N e a s y T i s s u e K i t (Q I A G E N ) 或其他用来提取基因组 D N A 电转移用的大肠