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        人绒毛外滋养细胞分离与培养

        实验分类:

        免疫学实验

        别名:

        extravillous cytotrophoblast,EVCT

        最新修订时间:

        简介

        滋养细胞生物学功能的正常行使是维持正常妊娠的关键环节。胚胎着床后,滋养细胞分裂、增殖,分化形成生物学特性明显不同的EVCT和绒毛滋养细胞(villous cytotrophoblasts,VCT)。


        它们是母胎界面唯一与母体免疫系统直接接触的胎儿细胞,在胚胎植入、母胎免疫耐受过程中发挥重要作用。


        作为滋养细胞分化的终末细胞,EVCT体外培养后可贴壁,由最初的卵圆形逐渐伸展成纺锤形、星形或多角形;EVCT可迁移、聚集,但不融合,增殖能力低。


        表达角蛋白7,不表达波形蛋白。HLA-G仅表达于EVCT,可作为其筛选标记,进一步完善滋养细胞的评价与鉴定。

        原理

        人绒毛外滋养细胞分离与培养的基本原理是EVCT具有侵袭能力,在子宫蜕膜深部聚集形成孤岛,与子宫蜕膜细胞接触最为密切,是母胎免疫微环境的重要组成部分。


        从蜕膜中挑选出绒毛组织,通过酶消化后研磨过滤,并进行密度梯度离心,根据细胞的密度吸取40% 密度层初步获得滋养细胞,通过不同时间短期培养进一步纯化EVCT。


        然后根据细胞的形态、表型及功能特点,利用免疫组织化学或荧光抗体同时标记细胞表面抗原进行流式细胞术分选等技术方法对细胞进行鉴定、分离和纯化,为深入探讨滋养细胞生物功能打下基础。

        来源:丁香实验团队

        操作方法

        人绒毛外滋养细胞分离与培养

        滋养细胞生物学功能的正常行使是维持正常妊娠的关键环节。胚胎着床后,滋养细胞分裂、增殖,分化形成生物学特性明显不同的EVCT和绒毛滋养细胞(villous cytotrophoblasts,VCT)。它们是母胎界面唯一与母体免疫系统直接接触的胎儿细胞,在胚胎植入、母胎免疫耐受过程中发挥重要作用。作为滋养细胞分化的终末细胞,EVCT体外培养后可贴壁,由最初的卵圆形逐渐伸展成纺锤形、星形或多角形;EVC

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