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        离子细胞化学实验 

        实验分类:

        免疫学实验

        最新修订时间:

        简介

        离子细胞化学可用来显示细胞内离子定位分布,目前用得比较多的是显示细胞内钙的分布,通常需结合EDX能谱分析。

        细胞内钙离子分布是高度隔室化的,形成钙离子浓度不同的钙池,正常情况下,细胞内胞浆、线粒体、核等部位都有钙的分布;在大多病理情况下(如缺血、缺氧、中毒等),细胞内钙可升高,并且进入到细胞内的钙很多进入到线粒体内。细胞内钙离子细胞化学的原理是:首先用磷酸盐或草酸盐与钙离子反应,在原位形成沉淀,然后再用焦锑酸盐反应,替代磷酸盐或草酸盐形成焦锑酸钙,焦锑酸钙在电子显微镜下为电子致密物质。



        来源:丁香实验

        操作方法

        钙离子细胞化学具体方法

        1. 组织切成约 1 mm3 的小块,用 0.09 mol/L 磷酸钾(或草酸钾)-3% 戊二醛(pH 7.3,用 0.1%~1% KOH 调 pH)固定 4 h 以上,4℃。也有人推荐固定早期用微波照射,以加速固定液渗入细胞内部(关于微波照射使用情况参见有关章节)。2. 固定后用 0.09 mol/L磷酸钾(或草酸钾)-4% 蔗糖(pH 7.3)漂洗2~4 h,换液3 次。3. 1.5%~2%

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