免疫学实验

介绍了如何选择一条合成肽用以制备识别完整蛋白的抗血清：包括如何选 择 合 适 的 多 肽 用 来 免 疫 ，如 何 将 多 肽 结 合 至 载 体 蛋 白 及 设 计 合 成 多 价 抗 原 肽 阐述了针对抗原肽的抗血清的制备方法，同 时 介 绍 了 免 疫 接 种 流 程 、E L I S A 法测定抗体滴度及亲和层析法纯化能够与抗体特异结合的多肽的方法。作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，

H I V 培养和定量方法及H I V 感染物引起细胞病变能力的评估方法，H I V 感 染 新 鲜 C D 4+ T 细胞和细胞系的方法，以及用对病毒有抗性的细胞来产生慢性感染细胞系的方法 H I V 感染单核/巨噬细胞，包括在这些细胞中培养和定量检测H I V ，以及重新感染新鲜培养的单核细胞和巨噬细胞的方法。作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

ELISA 法检测体内抗体的产生作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

本方法可检测血清或细胞培养上清中IgG、 I g M 和 IgA (图 8. 1 0 . 1 ) 的含量。检测孔中液体颜色的深浅与上清中I g 的含量成正比作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

以下以美洲商陆蛋白为例介绍丝裂原诱导的B 细胞产生抗体。本方法经调整后也适用于其他多种刺激因子和淋巴细作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

与分析Ficoll分离后的单个核细胞相比，本方法分析全血细胞，因而所用时间短，需要的样本量少，并且可以避免Ficoll分离后的细胞，尤 其 是 B 细胞的损失。作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

抗 C D 1 9 标 记分离出的B 细胞 ，其信号强度相对较低，所显示出的有丝分裂和抗体分泌反应都与阴性筛选得到的B细胞类似。为预防阳性选择可能激活细胞，可用抗体的F (al/)2 片段。作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

对于颗粒性抗原或脂质体包裹的抗原，应用巨噬细胞作为抗原呈递细胞。作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

本方案可对微量的N K T 细胞进行鉴定和定量分析。应采取有效措施阻断非特异染色 ，以获得可靠的实验结果。本实验联用两种单抗以确保结果的特异性。作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

具有肿瘤细胞杀伤活性的小鼠巨噬细胞株，如 A N A -1 和 G G 2E E 。小鼠原代巨噬细胞可新鲜分离。作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

一种巨噬细胞吞噬功能和杀伤功能的检测方法。作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

本 方 案 通 过 检 测 活 化 后 巨 噬 细 胞 （贴 壁 型 或 非 贴 壁 型 ）培养上清 中 亚 硝 酸 盐的含量，反映一氧化氮的分泌水平作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

由于缺乏巨噬细胞或巨噬细胞不同分化阶段特征性的表面标志，目前根据不同类型巨曬细胞的表面分子.表达谱，联合运用多种荧光素标记的单抗，经流式细胞仪检测后鉴定巨噬细胞作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

介绍一种小鼠巨噬细胞分离的方法作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

实验所用的细胞是小鼠的L 929成纤维细胞，这种细胞具有对干扰素和V S V 的高敏感性。细胞应当来源于已经建立此项检测的实验室而非商业化的途径。持续而稳定的细胞传代有益于检测结果的可信度。但是以每周一次传代的频率持续4〜6 个月的传代后 ，达 到 l〇〇 %C P E 的时间会延长而且终点会变得较为模糊。当有此种现象发生时，应更换新的细胞株。作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精

酶联免疫斑点实验（酶联免疫斑点实验（ELISPOT) 的原理是分泌某些蛋白质分子（如细胞因子）的细胞在短时间内能够分泌相对较高浓度的蛋白质分子到周围环境中。作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

本方案是检测体外活化的抗原特异性T 细胞产生细胞因子的方法。如果在体外用其他刺激物或刺激细胞（如 用 L P S 刺激单核细胞），或体内刺激的细胞直接在体外分析，从用捕获试剂标记刺激细胞（步 骤 6 ) 开始。作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」