无氧氧化途径中关键酶和重要产物测定

实验分类：

蛋白质实验

最新修订时间：2025-08-28

简介

葡萄糖经历糖酵解（glycolysis）的 10 步代谢反应，生成酮酸，然后进一步生成乳酸，或者进入线粒体脱羧成为乙酰辅酶 A（CoA），进入柠檬酸循环。在葡萄糖无氧氧化生成乳酸的代谢途径中，有 4 个关键酶决定着反应速度和方向，即己糖激酶（hexokinase，HK）、磷酸果糖激酶－1（phosphofructokinase－1，PFK－1）、丙酮酸激酶（pyruvate kinase，PK）和乳酸脱氢酶（lacticdehydrogenase，LDH）。重要的产物是丙酮酸和乳酸。

无氧氧化途径中关键酶和重要产物测定实验就是在葡萄糖无氧氧化生成乳酸的代谢途径中产生的关键酶和产物。

目前关于无氧氧化途径中关键酶和重要产物测定的方法主要有 6 种：HK1 活性测定、PFK－1 活性测定、PK 活性测定、LDH 活性测定、丙酮酸含量测定和乳酸含量测定。

原理

无氧氧化途径中关键酶和重要产物测定的基本原理是在葡萄糖无氧氧化生成乳酸的代谢途径中产生的关键酶和产物，可通过比色分析法，利用分光光度计或酶标仪进行检测。

来源：丁香实验团队

操作方法

HK1 活性测定

测定己糖激酶活性对于了解细胞糖代谢的状态具有重要意义。 HK 是葡萄糖分解代谢途径中的第一个关键酶，催化葡萄糖转化为葡萄糖－6－磷酸。HK 共有 4 种同工酶，目前的研究主要集中于 HK I 和 HK II。葡萄糖－6－磷酸是糖酵解、磷酸戊糖途径、糖原合成和糖异生等代谢过程的交叉点。