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        离子交换层析法蛋白质的纯化实验

        实验分类:

        蛋白质实验

        最新修订时间:

        简介

        离子交换层析在纯化蛋白质的层析手段中使用最为广泛。它对蛋白质的分辨率高,操作简易,重复性好,成本低。按照离子交换原理,蛋白质可从大量缓冲性溶液中被分离,所以此方法尤适于蛋白质粗提物的初始纯化。在分离蛋白质时,速度往往是很重要的。 如蛋白酶的初始分离和不稳定蛋白质的纯化。离子交換层析提供了很多加速分离的手段。这些特点使离子交换层析成为极具价值的蛋白质纯化手段和设计蛋白质纯化方案时可行性很强的出发点。


        来源:《蛋白质技术手册》

        来源:丁香实验

        操作方法

        离子交换层析法

        1. 离子交换树脂的选择阴离子交换树脂用于处理净电荷为负的蛋白质;阳离子交换树脂用于处理净电荷为正的蛋白质。DEAD 或 CM-Sepharose 等琼脂基的树脂对很多蛋白质都是适用的。1.1 离子交换树脂的类型离子交换树脂除了以阴、阳分类外,还分为强离子交换树脂和弱离子交换树脂。强离子交换树脂在大部分 pH 范围内离子化程度都很高,弱离子交換树脂在工作 pH 值时离子化程度则很低。强离子交换树脂

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