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        不连续非变性凝肢电泳实验

        实验分类:

        蛋白质实验

        最新修订时间:

        简介

        非变性凝胶电泳,也称为天然凝胶电泳。在凝胶中蛋白质的分离取决于它所带电荷及分子大小。按丙烯酰胺凝胶孔径大小去筛分不同尺寸蛋白质的同时,在分离胶酸性 pH 条件下高电荷的蛋白质的泳动速度会更快。这种方法可以区分仅有一个电荷单位差别的分子。与 SDS-PAGE 电泳相比,非变性凝胶大大降低了蛋白质变性发生的机率。

        来源:《蛋白质技术手册》

        来源:丁香实验

        操作方法

        不连续非变性凝肢电泳

        1. 工作溶液配制2. 工作溶液用量(1)制备不同厚度电泳凝胶所需的溶液体积制备两块 6 cm×8 cm 的凝胶配制量应比实际用量稍多些。(2)X% 分离胶的计算3. 制备分离胶(1) 按操作指南装配好灌胶用的模具;(2) 将 A 液、B 液和水在小的三角瓶或试管中混合(由于丙烯酰胺具有神经毒性。 应戴手套操作);(3) 在温和搅拌下,加入过硫酸铵,TEME 混匀。由于这一步中发生聚合,动作要迅速

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