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简介
蛋白质可以在包被或非包被的毛细管柱分离,分离方案的选择取决于靶蛋白的特异属性。最重要的属性就是pl,这由一般的凝胶电泳或CE决定。等电点聚焦分离是CE分离的一种。
内容来源于《精编分子生物学实验指南(第五版)》
来源:丁香实验
操作方法
1. 将两性电解质混合物加入 0.5 ml 蛋白质样品中以达到两性电解质终浓度 2.5%(V/V)。如果需要,加入 IEF 标记达到终浓度 0.1 mg/ml 以校准柱子。2. 加入样品池。以增压池子(0.5 lb/in2) 的方式注满毛细管。3. 在阳极池(负极)内放置 10 mmol/L 磷酸,在阴极池(正极)放置 20 mmol/L NaOH。4. 在 8~10 kV 恒定电压下聚焦样品 4