包涵体蛋白溶解后的重折叠实验

实验分类：

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

当蛋白质在大肠杆菌和其他表达宿主内高水平表达时，通常会发现它们中的大部分是不溶的, 并以称为包涵体的不溶形式存在。尽管包涵体形成的准确机制还不完全清楚，而且可能因蛋白质和表达条件而异，但通常认为是由于目标蛋白质的表达速率快于其折叠出天然结构的速率。
作者：伯吉斯等,主译：陈薇，本实验来自「蛋白质纯化指南」

来源：丁香实验

操作方法

包涵体蛋白溶解后的重折叠实验

一、常规操作方案下面这个典型流程对许多蛋白质都有很好的效果。本操作方案是根据 N g u y e n 等(1993)首先开发的方案改编而成，并用于冷泉港蛋白质纯化与鉴定课程的不溶性重组蛋白纯化部分（Burgess and K n u t h ， 1996)。其他类似的流程也可能给出相似的结果，但我们实验室几乎只使用该流程。下面我们将会对关键步骤进行讨论。