用亚氨基二乙酸（铁螯合）Sepharose6B 分离磷酸肽实验

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

在进行蛋白质（phosphorylated protein) 的结构与功能分析时，接蛋白质水解后即能将磷酸肽与未修饰的（未磷酸化的）肽分开是很有助益的。可利用的最有效的方法之一是使用载有铁 (正铁离子）的金属螯合填料。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。

来源：丁香实验

操作方法

用亚氨基二乙酸（铁螯合）Sepharose6B 分离磷酸肽实验

材料与设备 Sepharose 6B 柱（1x6 cm;~5 ml), 含亚氨基二乙酸（铁螯合)，（柱的理论容量为~2umol 的磷蛋白）（Pharmacia Biotech Inc.) Tris-HCl(50 mmoI/L;pH7.6), 含 EDTA(100 mmol/L) 和 NaCl(500 mmol/L) 氯化铁（50 mmol/L) 乙酸（0.1mol/L) 乙酸钠（0.1m