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由非变性凝胶电泳迁移率法评估均一性实验

实验分类:

蛋白质实验

最新修订时间:

简介

当蛋白质在保持其天然构型不变的条件下进行电泳时,其迁移率可以作为它的均一性的一种量度。由于迁移率是电荷和形状两者的函数,因此可以预期,能将单体、二聚体等形式彼此分开。也有可能因异构体形状的差异而用非变性凝胶电泳把蛋白质的构象异构体(conformational isomer) 分开。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。

来源:丁香实验

操作方法

由非变性凝胶电泳迁移率法评估均一性实验

材料与设备 核心 RNA 聚合酶 核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物,由免疫亲和柱洗脱所得 σ32,由 POROS 50S 阳离子交换柱洗脱所得 非变性凝胶电泳装置 试剂 非变性胶样品缓冲液(2X)(同 SDS 样品缓冲液,但不含 SDS。) 储存缓冲液 考马斯亮蓝(CBB) 染色液 脱色液 (配方,见"试剂的配制",PP.184~189) 操作程序 1) 制备非变性胶(

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